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遠慕教您如何分析高效液相色譜圖
點擊次數(shù):496 更新時間:2024-10-08

色譜圖,其實簡單地講,是一個橫坐標是時間,縱坐標是電信號的二維圖譜。

高效液相色譜法,你可以簡單地想象,固定相是一個多空海綿狀的柱形結構,樣品在孔洞中進進出出。因為各個物質(zhì)的吸附能力不同,所以才會在色譜圖中拉開距離。

和實驗相關的參數(shù):

1、保留時間-也就是可以定性的數(shù)據(jù)參數(shù)

如果使用同樣的色譜柱,同樣的流動相,分析同樣的樣品,那么這個樣品的保留時間,應該是固定的。不同保留時間的色譜峰,應該表現(xiàn)出的是不同的物質(zhì)。如果你跑的是反相色譜,那么色譜峰越靠后,它對應物質(zhì)的極性也就越小。

2、峰面積-也就是可以定量的數(shù)據(jù)參數(shù)

這是你在色譜圖中可以讀出來的參數(shù),在同一個色譜條件下,同一個物質(zhì)的濃度和峰面積是成正比的。也就是說,如果你配制1.0mg/ml的X物質(zhì),進樣后峰面積是10000,那么,你配制0.5mg/ml的X物質(zhì),進樣后峰面積差不多就是5000

3、波長-這個是可以順利進行試驗的前提條件

同一樣品,同一方法,同一色譜柱,在不同波長的峰面積是不同的。一個物質(zhì)指在某些特殊波長下有吸收。比如一個物質(zhì)在210nm和254nm處有吸收。那么波長在280nm處可能無法檢出該物質(zhì)。所以一個實驗方法開始時要進行波長掃描。

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